1、慢病毒：

①过表达慢病毒：

简介：

过表达慢病毒服务是根据客户提供的基因信息，将目的基因的cDNA序列连接到不同的慢病毒载体上，通过与慢病毒包装辅助质粒和包膜质粒共转染293T细胞，收集上清进行浓缩纯化，获取高滴度的慢病毒，可于直接感染目的细胞，获得过表达目的基因的细胞系，以用于基因功能研究。

贵州双螺旋生物提供的过表达慢病毒产品适合于人源、小鼠、大鼠等物种的基因的表达。

特点：

慢病毒载体作为目前细胞及模式生物实验中常用工具，具有其独特的优势。

（1）广泛宿主：可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型细胞，特别适合质粒载体转染效率低的细胞；

（2）可实现稳定表达：慢病毒通过将外源基因有效的整合到宿主染色体上，可实现目的基因长时间稳定表达，不随着细胞分裂传代而丢失，是细胞实验的首选。

（3）安全性高：未发现致病性，已被用于作用于人体的CAR-T治疗。

（4）适用范围广：可用于体外细胞系和活体动物模型，研究基因和RNAi等；

（5）实现可调控表达：经过特定的元件修饰的慢病毒表达载体，可实现只有在特定的外源或内源物质的作用下才能产生表达，从而调控目的基因的定时、定量表达。

服务流程：

②干扰慢病毒：

简介：

RNA干扰(RNA interference, RNAi) 是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA, dsRNA) 导入细胞后，能特异性地降解该mRNA，从而产生相应的功能表型缺失。

RNAi提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。现今发现的主要起干扰作用的RNAi主要有两类小分子RNA：一类是microRNA（miRNA）；另一类是siRNA （small interfering RNA）。

siRNA制备的方法一般有：化学合成siRNA，哺乳动物细胞载体shRNA克隆和慢病毒载体shRNA克隆。

将慢病毒载体的shRNA质粒与慢病毒包装辅助质粒和包膜质粒共转染293T细胞，收集上清进行浓缩纯化，获取高滴度的慢病毒，相对于SiRNA和shRNA质粒，shRNA慢病毒的感染范围更广，如依赖转染试剂难转染的细胞：原代细胞、悬浮细胞等，并可实现稳定、长效抑制基因表达。

特点：

与化学合成siRNA和基于瞬时表达载体构建的shRNA相比，利用慢病毒构建的shRNA：一方面可以扩增瞬时表达的载体使用，另一方面，lentivirus-shRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞，悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。

贵州双螺旋生物科技（上海）有限公司主要提供以慢病毒为主的应用于临床前细胞学实验和整体动物实验的针对不同基因和药物靶标的各种即用型病毒颗粒。利用相关载体把shRNA导入细胞，载体中的U6启动子确保shRNA表达；这种装载了shRNA载体可被传递到子代细胞中去，从而使基因的沉默是可遗传的。

推荐使用：

（1）适用于在难以转染的细胞中进行的RNA干扰研究，如原代神经细胞，干细胞，肿瘤细胞等；

（2）适用于快速建立稳定表达沉默特定基因的细胞株；

（3）适用于In vivo 实验，包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射等；

（4）适用于转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。

服务流程：